سنگل ہیڈر بینر

کیا الٹرا فلٹریشن سینٹری فیوج ٹیوبوں کو دوبارہ استعمال کیا جا سکتا ہے؟یہ رہا جواب

سینٹری فیوج ٹیوب ایک سادہ ٹیوب ہے جو تیز گردشی رفتار اور دباؤ کو برداشت کر سکتی ہے، جیسے کچھ نمونوں کو الگ کرنا اور سپرنٹنٹ تلچھٹ کو الگ کرنا۔الٹرا فلٹریشن سینٹرفیوج ٹیوب کے دو حصے ہوتے ہیں جیسے اندرونی ٹیوب اور بیرونی ٹیوب۔اندرونی ٹیوب ایک خاص سالماتی وزن کے ساتھ ایک جھلی ہے۔تیز رفتار سینٹری فیوگریشن کے دوران، چھوٹے مالیکیولر وزن والے نچلی ٹیوب (یعنی بیرونی ٹیوب) میں لیک ہو جائیں گے، اور جن کا مالیکیولر وزن زیادہ ہے وہ اوپری ٹیوب (یعنی اندرونی ٹیوب) میں پھنس جائے گا۔یہ الٹرا فلٹریشن کا اصول ہے اور اکثر نمونوں کو مرتکز کرنے کے لیے استعمال ہوتا ہے۔

الٹرا فلٹریشن سینٹری فیوج ٹیوبیں عام طور پر پری ٹریٹمنٹ کے بغیر استعمال کی جا سکتی ہیں، لیکن پروٹین کے نمونے کی پروسیسنگ کے لیے، خاص طور پر کمزور پروٹین سلوشنز (<10ug/ml) کے لیے، الٹرا فلٹریشن میمبرینز کے ساتھ ارتکاز کی بحالی کی شرح اکثر مقداری نہیں ہوتی ہے۔اگرچہ PES مواد غیر مخصوص جذب کو کم کرتے ہیں، کچھ پروٹین، خاص طور پر جب وہ پتلے ہوتے ہیں، مسائل ہو سکتے ہیں۔غیر مخصوص بائنڈنگ کی ڈگری انفرادی پروٹین کی ساخت کے ساتھ مختلف ہوتی ہے۔چارج شدہ یا ہائیڈروفوبک ڈومینز پر مشتمل پروٹین کے مختلف سطحوں کے ساتھ ناقابل واپسی طور پر منسلک ہونے کا زیادہ امکان ہوتا ہے۔الٹرا فلٹریشن سینٹری فیوج ٹیوب کی سطح پر پاسیویشن پریٹریٹمنٹ جھلی کی سطح پر پروٹین جذب کے نقصان کو کم کر سکتا ہے۔زیادہ تر معاملات میں، پتلا پروٹین محلول کو ارتکاز کرنے سے پہلے کالم کا پہلے سے علاج کرنے سے بحالی کی شرح بہتر ہو سکتی ہے، کیونکہ یہ محلول جھلی اور سطح پر موجود خالی پروٹین جذب کرنے والی جگہوں کو بھر سکتا ہے۔پاسیویشن کا طریقہ یہ ہے کہ کالم کو زیادہ مقدار میں پاسیویشن سلوشن کے ساتھ 1 گھنٹے سے زیادہ پہلے بھگو دیں، کالم کو ڈسٹل واٹر سے اچھی طرح دھو لیں، اور پھر اسے ایک بار ڈسٹل واٹر سے سینٹری فیوج کریں تاکہ فلم پر باقی رہ جانے والے پاسیویشن سلوشن کو مکمل طور پر ختم کیا جا سکے۔ .ہوشیار رہیں کہ گزرنے کے بعد فلم کو خشک نہ ہونے دیں۔اگر آپ اسے بعد میں استعمال کرنا چاہتے ہیں، تو آپ کو فلم کو نم رکھنے کے لیے جراثیم سے پاک ڈسٹل واٹر شامل کرنے کی ضرورت ہے۔

الٹرا فلٹریشن سینٹری فیوج ٹیوبوں کو عام طور پر جراثیم سے پاک اور دوبارہ استعمال نہیں کیا جاسکتا۔چونکہ ایک ٹیوب کی قیمت سستی نہیں ہے، اس لیے بہت سے لوگ اسے دوبارہ استعمال کرنے کی کوشش کرتے ہیں - تجربہ یہ ہے کہ جھلی کی سطح کو آست پانی سے کئی بار صاف کیا جائے اور اسے ایک یا دو بار سینٹری فیوج کیا جائے۔چھوٹی ٹیوب جسے ریورس میں سینٹرفیوج کیا جا سکتا ہے اسے ڈسٹل واٹر میں ڈبویا جا سکتا ہے اور پھر زیادہ بار ریورس میں سینٹرفیوج کیا جا سکتا ہے، جو بہتر ہوگا۔اسے ایک ہی نمونے کے لیے بار بار استعمال کیا جا سکتا ہے، اور استعمال میں نہ ہونے پر اسے آست پانی میں بھگویا جا سکتا ہے، لیکن بیکٹیریل آلودگی کو روکا جائے گا۔مختلف نمونوں کو مکس نہ کریں۔کچھ لوگ کہتے ہیں کہ 20% الکحل اور 1n NaOH (سوڈیم ہائیڈرو آکسائیڈ) میں بھگو کر بیکٹیریا کی افزائش کو روک سکتا ہے اور خشک ہونے سے بچا سکتا ہے۔جب تک الٹرا فلٹریشن جھلی پانی پر حملہ کرتی ہے، اسے خشک ہونے کی اجازت نہیں دی جا سکتی۔تاہم، دوسروں کا کہنا ہے کہ یہ جھلی کی ساخت کو تباہ کر دے گا.کسی بھی صورت میں، مینوفیکچررز عام طور پر دوبارہ استعمال کی حمایت نہیں کرتے ہیں.بار بار استعمال فلٹر جھلی کے تاکنا سائز کو روک دے گا، اور یہاں تک کہ مائع کے رساو کا سبب بنے گا، جو تجرباتی نتائج کو متاثر کرے گا۔

 


پوسٹ ٹائم: ستمبر 05-2022