کامن مائکروبیل کلچر میڈیا کا تعارف (I)
کلچر میڈیم ایک قسم کا مخلوط غذائیت کا میٹرکس ہے جو مصنوعی طور پر مختلف مادوں سے مختلف مائکروبیل نمو کی ضروریات کے مطابق تیار کیا جاتا ہے، جو مختلف مائکروجنزموں کو کلچر یا الگ کرنے کے لیے استعمال ہوتا ہے۔لہذا، غذائیت کے میٹرکس میں غذائی اجزاء (بشمول کاربن کا ذریعہ، نائٹروجن کا ذریعہ، توانائی، غیر نامیاتی نمک، ترقی کے عوامل) اور پانی ہونا چاہئے جو مائکروجنزموں کے ذریعہ استعمال کیا جاسکتا ہے۔مائکروجنزموں کی قسم اور تجربے کے مقصد پر منحصر ہے، ثقافت میڈیا کی مختلف اقسام اور تیاری کے طریقے ہیں۔
تجربے میں کچھ عام کلچر میڈیا کو درج ذیل کے طور پر متعارف کرایا گیا ہے:
غذائی آگر میڈیم:
غذائیت ایگر میڈیم عام بیکٹیریا کے پھیلاؤ اور ثقافت کے لیے استعمال کیا جاتا ہے، بیکٹیریا کی کل تعداد کے تعین، بیکٹیریا کی نسلوں کے تحفظ اور خالص ثقافت کے لیے۔اہم اجزاء ہیں: گائے کے گوشت کا عرق، خمیر کا عرق، پیپٹون، سوڈیم کلورائیڈ، آگر پاؤڈر، آست پانی۔پیپٹون اور بیف پاؤڈر نائٹروجن، وٹامن، امینو ایسڈ اور کاربن کے ذرائع فراہم کرتے ہیں، سوڈیم کلورائیڈ متوازن آسموٹک پریشر کو برقرار رکھ سکتا ہے، اور آگر کلچر میڈیم کا کوگولنٹ ہے۔
نیوٹریشنل ایگر سب سے بنیادی قسم کا کلچر میڈیم ہے، جس میں مائکروبیل گروتھ کے لیے درکار زیادہ تر غذائی اجزاء ہوتے ہیں۔غذائی اجار کو معمول کے بیکٹیریل کلچر کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے۔
خون کا آگر میڈیم:
بلڈ ایگر میڈیم ایک قسم کا بیف ایکسٹریکٹ پیپٹون میڈیم ہے جس میں ڈیفبرینیٹڈ جانوروں کا خون ہوتا ہے (عام طور پر خرگوش کا خون یا بھیڑ کا خون)۔اس لیے، بیکٹیریا کی کاشت کے لیے درکار مختلف غذائی اجزاء کے علاوہ، یہ coenzyme (جیسے فیکٹر V)، ہیم (فیکٹر X) اور دیگر خاص نشوونما کے عوامل بھی فراہم کر سکتا ہے۔لہٰذا، بلڈ کلچر میڈیم اکثر بعض پیتھوجینک مائکروجنزموں کی کاشت، الگ تھلگ اور محفوظ رکھنے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے جو کہ غذائیت کا مطالبہ کر رہے ہیں۔
اس کے علاوہ، خون کا آگر عام طور پر ہیمولائسز ٹیسٹ کے لیے استعمال ہوتا ہے۔نشوونما کے عمل کے دوران، کچھ بیکٹیریا خون کے سرخ خلیوں کو توڑنے اور تحلیل کرنے کے لیے ہیمولیسن پیدا کر سکتے ہیں۔جب وہ خون کی پلیٹ پر بڑھتے ہیں تو کالونی کے ارد گرد شفاف یا پارباسی ہیمولیٹک حلقے دیکھے جا سکتے ہیں۔بہت سے بیکٹیریا کی روگجنکیت ہیمولٹک خصوصیات سے متعلق ہے۔چونکہ مختلف بیکٹیریا کے ذریعہ تیار کردہ ہیمولیسن مختلف ہے، ہیمولیٹک صلاحیت بھی مختلف ہے، اور خون کی پلیٹ پر ہیمولیسس کا رجحان بھی مختلف ہے۔لہذا، ہیمولیس ٹیسٹ اکثر بیکٹیریا کی شناخت کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔
TCBS میڈیم:
ٹی سی بی ایس تھیو سلفیٹ سائٹریٹ بائل سالٹ سوکروز ایگر میڈیم ہے۔پیتھوجینک وائبریو کی منتخب تنہائی کے لیے۔پیپٹون اور خمیر کے عرق کو کلچر میڈیم میں بنیادی غذائی اجزاء کے طور پر استعمال کیا جاتا ہے تاکہ نائٹروجن کا ذریعہ، کاربن کا ذریعہ، وٹامنز اور بیکٹیریا کی نشوونما کے لیے درکار دیگر نشوونما کے عوامل فراہم کیے جائیں۔سوڈیم کلورائد کا زیادہ ارتکاز وبریو کی ہیلوفیلک نمو کی ضروریات کو پورا کر سکتا ہے۔خمیر کاربن ذریعہ کے طور پر سوکروز؛سوڈیم سائٹریٹ، ہائی پی ایچ الکلین ماحول اور سوڈیم تھیو سلفیٹ آنتوں کے بیکٹیریا کی نشوونما کو روکتے ہیں۔گائے کے پتوں کا پاؤڈر اور سوڈیم تھیو سلفیٹ بنیادی طور پر گرام پازیٹو بیکٹیریا کی افزائش کو روکتے ہیں۔اس کے علاوہ، سوڈیم تھیو سلفیٹ سلفر کا ذریعہ بھی فراہم کرتا ہے۔فیرک سائٹریٹ کی موجودگی میں، ہائیڈروجن سلفائیڈ کا بیکٹیریا کے ذریعے پتہ لگایا جا سکتا ہے۔اگر ہائیڈروجن سلفائیڈ پیدا کرنے والے بیکٹیریا موجود ہوں تو پلیٹ پر سیاہ تلچھٹ پیدا ہو جائے گی۔TCBS میڈیم کے اشارے بروموکریسول نیلے اور تھامول بلیو ہیں، جو کہ تیزابی بنیاد کے اشارے ہیں۔Bromocresol نیلا ایک تیزاب کی بنیاد کا اشارے ہے جس کی pH تبدیلی کی حد 3.8 (پیلا) سے 5.4 (نیلے سبز) ہے۔رنگت کی دو حدیں ہیں: (1) تیزاب کی حد pH 1.2~2.8 ہے، پیلے سے سرخ میں بدل رہی ہے۔(2) الکلی کی حد pH 8.0~9.6 ہے، پیلے سے نیلے رنگ میں بدل رہی ہے۔
TSA پنیر سویا بین پیپٹون آگر میڈیم:
TSA کی ساخت غذائی اجزا کی طرح ہے۔قومی معیار میں، یہ عام طور پر دواسازی کی صنعت کے صاف کمروں (علاقوں) میں آباد ہونے والے بیکٹیریا کی جانچ کے لیے استعمال ہوتا ہے۔ٹیسٹ کرنے کے لیے علاقے میں ٹیسٹ پوائنٹ کا انتخاب کریں، TSA پلیٹ کھولیں اور اسے ٹیسٹ پوائنٹ پر رکھیں۔مختلف اوقات میں 30 منٹ سے زیادہ ہوا کے سامنے آنے پر نمونے لیے جائیں گے، اور پھر کالونی کی گنتی کے لیے کلچر کیا جائے گا۔صفائی کی مختلف سطحوں کے لیے مختلف کالونی شمار کی ضرورت ہوتی ہے۔
مولر ہنٹن آگر:
MH میڈیم ایک مائکروبیل میڈیم ہے جو مائکروجنزموں کی اینٹی بائیوٹکس کے خلاف مزاحمت کا پتہ لگانے کے لیے استعمال ہوتا ہے۔یہ ایک غیر منتخب ذریعہ ہے جس پر زیادہ تر مائکروجنزم بڑھ سکتے ہیں۔اس کے علاوہ، اجزاء میں موجود نشاستہ بیکٹیریا کے ذریعے خارج ہونے والے زہریلے مواد کو جذب کر سکتا ہے، اس لیے یہ اینٹی بائیوٹک آپریشن کے نتائج کو متاثر نہیں کرے گا۔MH میڈیم کی ساخت نسبتاً ڈھیلی ہے، جو اینٹی بایوٹک کے پھیلاؤ کے لیے سازگار ہے، تاکہ یہ واضح نمو روکنے والے زون کو دکھا سکے۔چین کی صحت کی صنعت میں، MH میڈیم کو منشیات کی حساسیت کے ٹیسٹ کے لیے بھی استعمال کیا جاتا ہے۔کچھ خاص بیکٹیریا، جیسے Streptococcus pneumoniae کے لیے منشیات کی حساسیت کا ٹیسٹ کرواتے وقت، 5% بھیڑوں کا خون اور NAD مختلف غذائی ضروریات کو پورا کرنے کے لیے میڈیم میں شامل کیا جا سکتا ہے۔
ایس ایس آگر:
ایس ایس ایگر عام طور پر سلمونیلا اور شیگیلا کی منتخب تنہائی اور ثقافت کے لیے استعمال ہوتا ہے۔یہ گرام پازیٹو بیکٹیریا، زیادہ تر کالیفارمز اور پروٹیئس کو روکتا ہے، لیکن سالمونیلا کی نشوونما کو متاثر نہیں کرتا ہے۔سوڈیم تھیو سلفیٹ اور فیرک سائٹریٹ کو ہائیڈروجن سلفائیڈ کی نسل کا پتہ لگانے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے، جس سے کالونی کا مرکز سیاہ ہو جاتا ہے۔غیر جانبدار سرخ pH اشارے ہے۔خمیر کرنے والی چینی کی تیزاب پیدا کرنے والی کالونی سرخ ہوتی ہے، اور خمیر نہ کرنے والی چینی کی کالونی بے رنگ ہوتی ہے۔سالمونیلا سیاہ مرکز کے ساتھ یا اس کے بغیر بے رنگ اور شفاف کالونی ہے، اور شیگیلا بے رنگ اور شفاف کالونی ہے۔
پوسٹ ٹائم: جنوری 04-2023