پولیمریز چین ردعمل، مختصر طور پرپی سی آرانگریزی میں، ایک سالماتی حیاتیات کی تکنیک ہے جو مخصوص ڈی این اے کے ٹکڑوں کو بڑھانے کے لیے استعمال ہوتی ہے۔اسے جسم کے باہر ایک خاص ڈی این اے کی نقل سمجھا جا سکتا ہے، جس سے ڈی این اے کی بہت کم مقدار میں بہت زیادہ اضافہ ہو سکتا ہے۔پورے دورانپی سی آررد عمل کے عمل میں، مادوں کا ایک طبقہ اہم کردار ادا کرتا ہے - انزائمز۔
1. طاق ڈی این اے
کے ابتدائی دنوں میں تجربات میںپی سی آر, سائنسدانوں نے Escherichia coli DNA polymerase I کا استعمال کیا، لیکن اس انزائم کے ساتھ ایک مسئلہ ہے: اسے ہر بار ایک سائیکل انجام دینے پر نئے انزائم کو بھرنے کی ضرورت ہوتی ہے، جو آپریشن کے مراحل کو قدرے پیچیدہ بنا دیتا ہے اور اسے مکمل طور پر خود بخود بڑھانا مشکل ہوتا ہے۔یہ مسئلہ 1988 میں سائنسدانوں کی طرف سے غلطی سے ٹاک ڈی این اے پولیمریز کو تھرمس ایکواٹیکس سے الگ کرنے کے بعد حل ہو گیا۔اس انزائم کی دریافت بھی کرتا ہے۔پی سی آرٹیکنالوجی ایک آسان، عملی اور عالمگیر ٹیکنالوجی ہے۔فی الحال، Taq DNA پولیمریز DNA کٹس میں سب سے زیادہ عام پولیمریز ہے۔
2. PfuDNA
جیسا کہ اوپر ذکر کیا گیا ہے، Taq DNase میں ایک بڑا بگ ہے، اس لیے سائنسدانوں نے Taq DNA پولیمریز کو ایک خاص حد تک تبدیل کر دیا ہے تاکہ مماثلت نہ ہونے کی وجہ سے غیر مخصوص امپلیفیکیشن سے بچا جا سکے، جس کے نتیجے میں ٹیسٹ کے غلط نتائج برآمد ہوئے۔لیکن Taq DNA پولیمریز میں ترمیم کمرے کے درجہ حرارت پر DNA پولیمریز کی سرگرمی کو روک سکتی ہے۔PfuDNA پولیمریز Taq DNA پولیمریز کے مندرجہ بالا نقصانات کو اچھی طرح سے پورا کر سکتا ہے، تاکہ PCR کے رد عمل کو عام طور پر انجام دیا جا سکے، اور ٹارگٹ جین ایمپلیفیکیشن کی کامیابی کی شرح کو مؤثر طریقے سے بہتر بنایا جا سکے۔
3. ریورس ٹرانسکرپٹیز
ریورس ٹرانسکرپٹیس 1970 میں دریافت کیا گیا تھا۔ یہ انزائم RNA کو بطور ٹیمپلیٹ، dNTP بطور سبسٹریٹ استعمال کرتا ہے، بیس پیئرنگ کے اصول کی پیروی کرتا ہے، اور 5′-3′ سمت میں RNA ٹیمپلیٹ کے تکمیلی DNA سنگل اسٹرینڈ کی ترکیب کرتا ہے۔ریورس ٹرانسکرپٹیس بنیادی طور پر ڈی این اے یا آر این اے ٹیمپلیٹس سے ڈی این اے پولیمریز سرگرمی پر منحصر ہے اور اس وجہ سے اس کی کوئی 3′-5′ exonuclease سرگرمی نہیں ہے۔تاہم، اس میں RNase H سرگرمی ہے، جو ریورس ٹرانسکرپٹیس کی ترکیب کی لمبائی کو ایک خاص حد تک محدود کرتی ہے۔جنگلی ریورس ٹرانسکرپٹیس کی کم مخلصی اور تھرموسٹیبلٹی کی وجہ سے، سائنسدانوں نے اس میں بھی ترمیم کی۔
کے لیےپی سی آرتجربات، اہم استعمال کی اشیاء ہیں: انفرادی پی سی آر ٹیوب، 4/8 پٹی پی سی آر ٹیوب، پی سی آر پلیٹیں۔
لیبیو کاپی سی آر استعمال کی اشیاءمندرجہ ذیل ہےفوائد:
پی سی آر پلیٹیں۔: وسیع تھرمل سائیکلر مطابقت؛اعلی برعکس، آسان اچھی طرح سے شناخت؛اچھی طرح سے فلوروسینس کی عکاسی؛ اچھاگرمی کی منتقلی؛مصدقہ DNase، RNase، DNA، PCR روکنے والے، اور آزمائشی پائروجن سے پاک۔
انفرادی پی سی آر ٹیوبیں۔: بخارات سے بچنے والا؛ اچھاگرمی کی منتقلی؛بہترین نظری وضاحت؛ مصدقہ DNase، RNase، DNA، PCR inhibitors، اور آزمائشی پائروجن فری۔
4/8-سٹرپس پی سی آر ٹیوبیں۔: الٹرا پتلی دیواریں؛ اعلی وضاحت؛ اچھی فلوروسینس عکاسی؛فارماسیوٹیکل انڈسٹری، فوڈ انڈسٹری، اور مالیکیولر بائیولوجی میں استعمال کر سکتے ہیں؛ اعلیٰ معیار کا، ورجن پی پی مواد؛ مصدقہ DNase، RNase، DNA، PCR inhibitors، اور آزمائشی پائروجن فری۔
پوسٹ ٹائم: جون 09-2023